用于中华鳖养殖的
微生态制剂的研制及应用效果评价

张耀红¹    曹杰英²   袁春营³  康辰香²   葛京¹   王振怀⁴
（1-保定市水产研究所 2-河北省水产技术推广站 3-天津科技大大学 4-沧州市水产技术推广站）

　　目前的中华鳖养殖有其独特的特点：养殖水温恒定在30℃±2℃之间；养殖空间相对封闭；养殖容量相对较大；投喂均为高蛋白、高脂肪饲料，饲料残渣、代谢产物含有较高的有机氮等等。这些特点构成了与之适应的藻相、菌相。为此，我们从中华鳖养殖池的污泥及池水中对高效降解菌进行了筛选、鉴定；由沧州旺发生物技术研究所利用现代工艺进行批量生产，在我市阜平养鳖小区进行了试验推广，取得了较好的效果。
1.微生态制剂的研制
1.1降解菌的筛选
　　随机采取鳖池污水及池水水样分别接入灭菌的原水样中，30℃培养驯化3个周期，后将培养物在选择性培养基上平板分离，挑选菌落再培养，将培养菌株分别接种于原水样培养基，24h取样测一次TOC，从中筛选对TOC有明显降解作用的菌株，进一步作性能测试，鉴定。
1.2微生态制剂的制备
　　沧州旺发生物技术研究所根据鉴定结果用专制培养基进行扩大培养，利用现代工艺进行固化制成含活菌总数80亿/g并富含多种活性酶的微生态制剂。
2.微生态制剂的应用试验
2.1试验场地及基础条件
　　选择阜平山泉特种养殖场的1排2^#池、3^#池、4^#池作为试验场地，三池面积均为330m²，每池放养35g的鳖种4000只，投喂由河北师范大学生产的“康泰”牌中华鳖专用饲料，日饵率3-3.5%；试验水温30℃±2℃，水深60cm。
2.2试验方法
　　采用对照试验，其中3^#作为对照池，2^#池、4^#池作为试验池。2005年8月15日11时，2^#池泼洒研制的微生态制剂（代号Ⅰ，以下简称Ⅰ号），4#池泼洒由旺发生物技术研究所生产的通用微生态制剂---益水素（代号Ⅱ，以下简称Ⅱ号），定期分别测定水质的水化学指标、微生物指标和浮游生物量，与试验结束时测量幼鳖的生长、解剖观察内部器官。
2.2.1水化学指标测定 PH值用酸度计测定；COD采用酸性高锰酸钾法；NH₄⁺-N采用纳氏比色法；NO₂^--N采用　　盐酸萘胺比色法；NO₃^-采用酚二磺酸比色法；DO采用碘量法（早4：00测定）；透明度采用萨氏盘测定；总磷采用钼酸胺比色法；硫化氢采用碘量法。
2.2.2细菌菌群的分类计数
2.2.2.1样品的采集与处理 用灭菌细口瓶采集水样，以灭菌移液管吸取少量样本，在无菌试管中用无菌水作10倍系列稀释，取10³、10⁴倍稀释水样计数。
2.2.2.2细菌分类计数 主要测定水中气单胞菌、弧菌、芽孢杆菌、沙门氏菌、埃希氏菌5个属细菌的数量变化。选用与各属对应的选择性培养基，分别倾注到相同规格的灭菌平皿中，后取稀释的水样0.5ml分别涂布于无菌平皿中，每菌属一次作平行2个平皿。30℃培养24-28h后，直接计数平皿上的菌斑数，2个平行平皿的平均值即为本属的菌数。
2.2.2.3浮游生物量的测定 于每池上中下各取等量水样混匀，参照浮游生物资源量调查的方法分别固定、浓缩，用计数框计数，进行各池浮游植物、浮游动物的定量分析。
2.2.2.4生物学指标的测定 主要测量幼鳖的体宽、体厚、体重、裙边宽等指标，计算体比系数、裙边系数。
2.3结果
2.3.1微生态制剂对养鳖水体水化学指标的影响
　　表1是对照池、试验池在泼洒微生态制剂后的1-15d的水化学指标的测定结果。从表1、图1-4可以看出，2^#在1-15天内NH₄⁺-N、NO₂^--N、NO₃^-、COD、硫化氢逐渐减少，DO逐渐增加，4^#在1-10天内变化与2#相同，但第15d4^#池NH₄⁺-N、NO₂^--N、NO₃^-、COD硫化氢略有回升，DO略有下降；在整个试验期间PH、总磷变化不大，对照池的各项水化学指标变化均不显著。





2.3.2微生态制剂对养鳖水体主要菌群数量变动的影响
微生态制剂对养鳖水体主要菌群数量的影响见表2。从表2、图5-7可以看出，试验期间，随着时间的推移，气单胞菌、弧菌、沙门氏菌、埃希氏菌的数量逐渐降低，而芽孢杆菌的数量稳定增加。对照池中各菌群数量变化不大。




2.3.3微生态制剂对养鳖水体浮游生物种群结构、数量的影响
分别对3个池第1天、8天、15天的浮游动植物含量进行定性、定量分析，结果如表3、表4、表5、图8所示。




2.3.4微生态制剂对中华鳖生长的影响
9月1日随机抽测3个池幼鳖各25-33只，测量有关生物学指标，求其平均值；根据投喂饲料、死亡数量计算饵料系数及成活率。详情见。


3微生态制剂应用效果评价
　　微生态制剂对养殖用水的净化已有很多报道，但未见针对温室养鳖的专用制剂。我们从养鳖池水及池底淤泥中分离纯化出数种对TOC有显著降解作用的菌类，由沧州旺发经特殊工艺生产同时辅以多种活性酶而成的北方养鳖专用的微生态调水制剂，蛋白质含量丰富、成分齐全、营养价值较高。我们设计了不用微生态制剂、使用一般微生态制剂和专用微生态制剂三个组别，试验表明：养鳖池在使用微生态制剂后，水体的三态氮、硫化氢、有机耗氧量显著下降；溶氧明显提高；气单胞菌、弧菌等大幅降低，芽孢杆菌等有益菌大幅上升；生物量加大，生物循环旺盛，浮游动物中硅藻、隐藻品种、比例增加，蓝藻比例降低，浮游动物中轮虫增加。而专用微生态制剂的2^#池的效果又远远优于普通微生态制剂的4^#池，这也充分说明专用微生态制剂的菌类种类、配比对特定环境针对性强，15d之内各种理化因子、有益菌群向着有利方面持续变化，较普通微生态制剂作用更加显著、持久。

　　由于微生态制剂为中华鳖提供了理想的生活环境，中华鳖生长迅速，消化酶的活性增强，生长快、饲料转化率高。从表6可以看出2^#、4^#池各项生理体征显著优于对照组，其中2^#池的个体生长速度高于3^#池7.8%，高于4^#池2.9%，绝对增重高于3^#池29.2%，高于4^#池9.11%；经显著性检验，2^#池与3^#池、4^#与3^#的平均体重差异极显著，2^#池与4^##池差异显著。
以上试验结果虽然存在设计上的不完善和操作上的误差，但我们制备的中华鳖养殖专用微生态制剂在抑制致病菌生长、降解三态氮、降低有机耗氧量、增加DO、促进生长等方面的效果是极其显著的，值得推广。